Thermo賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0
在現(xiàn)代分子生物學(xué)、基因組學(xué)及診斷研究領(lǐng)域,對(duì)核酸樣本進(jìn)行精準(zhǔn)定量是確保下游實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵步驟?;跓晒鈾z測(cè)原理的定量技術(shù),以其高特異性與靈敏度,逐漸成為替代傳統(tǒng)紫外分光光度法的優(yōu)選方案。賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0作為該技術(shù)路線下的新一代設(shè)備,為實(shí)驗(yàn)室提供了更為便捷、準(zhǔn)確的微量核酸與蛋白定量工具,尤其適用于珍貴樣本或低濃度樣本的精準(zhǔn)測(cè)量。
賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0是ThermoFisherScientific推出的熒光定量分析儀。其設(shè)計(jì)核心在于采用熒光染料技術(shù),該染料僅在與目標(biāo)分子(如dsDNA、RNA、蛋白質(zhì))特異結(jié)合后才發(fā)出熒光,從而有效排除了鹽離子、游離核苷酸、溶劑等常見(jiàn)污染物的干擾,確保了濃度測(cè)量結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。
一、核心性能與技術(shù)創(chuàng)新
相較于前代或其他方法,賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0在多個(gè)方面實(shí)現(xiàn)了性能提升與操作優(yōu)化:
多功能的檢測(cè)通道與高靈活性:該儀器通常配備7個(gè)獨(dú)立的熒光檢測(cè)通道,能夠支持范圍廣泛的預(yù)置檢測(cè)試劑盒,涵蓋dsDNA、ssDNA、總RNA、microRNA以及蛋白質(zhì)等多種靶標(biāo)。這種多通道設(shè)計(jì)允許用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活選擇,一臺(tái)設(shè)備即可滿足多樣化的定量需求。
直觀的觸摸屏與引導(dǎo)式操作:設(shè)備采用大尺寸彩色觸摸屏界面,提供清晰的逐步操作指引。即使是新用戶也能快速上手,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)流程,減少了操作培訓(xùn)時(shí)間。
寬廣的檢測(cè)范圍與高靈敏度:針對(duì)不同類型的檢測(cè),儀器提供了寬廣的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍。其靈敏度較高,能夠準(zhǔn)確檢測(cè)低至皮克級(jí)別的微量樣本,這對(duì)于下一代測(cè)序文庫(kù)的準(zhǔn)確定量、稀有樣本分析等應(yīng)用尤為重要。
快速測(cè)量與數(shù)據(jù)管理:?jiǎn)蝹€(gè)樣品的測(cè)量時(shí)間通常僅需數(shù)秒,配合可選的多管適配器,能夠提升小批量樣本的處理效率。儀器內(nèi)部可存儲(chǔ)大量檢測(cè)數(shù)據(jù),并可通過(guò)USB接口輕松導(dǎo)出,便于后續(xù)分析與記錄。
二、應(yīng)用場(chǎng)景與工作流程價(jià)值
賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0的應(yīng)用貫穿于多個(gè)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié):
下一代測(cè)序(NGS)工作流:在NGS文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中,對(duì)片段化后的DNA或最終文庫(kù)進(jìn)行精確定量,是確保測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量與均衡性的關(guān)鍵步驟,直接影響測(cè)序成功率。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR):為qPCR反應(yīng)提供精確的模板起始量,有助于獲得準(zhǔn)確的Ct值,提升基因表達(dá)定量等實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性與可靠性。
蛋白質(zhì)組學(xué)研究:使用特定的蛋白定量試劑盒,能夠快速測(cè)定蛋白質(zhì)樣品的濃度,為后續(xù)的WesternBlot、質(zhì)譜分析等提供標(biāo)準(zhǔn)化的樣本輸入。
分子克隆與常規(guī)核酸分析:在質(zhì)粒提取、PCR產(chǎn)物純化后,提供準(zhǔn)確的濃度和總量信息,方便下游的酶切、連接、轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)的配比計(jì)算。
三、選擇與使用考量
在選擇和使用賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0時(shí),以下幾點(diǎn)可供參考:
針對(duì)性的檢測(cè)需求:需明確實(shí)驗(yàn)室主要的檢測(cè)對(duì)象(如DNA、RNA或蛋白),并確認(rèn)儀器配套的試劑盒是否滿足應(yīng)用要求。
通量與效率平衡:對(duì)于樣本量較大的實(shí)驗(yàn)室,可關(guān)注其批處理能力與操作便捷性,以提升整體工作效率。
數(shù)據(jù)整合需求:考慮儀器數(shù)據(jù)輸出格式是否便于融入實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的電子記錄或樣本管理系統(tǒng)。
總結(jié)
總而言之,Thermo賽默飛微量核酸定量?jī)xQubit4.0憑借其基于特異性熒光的精準(zhǔn)定量原理、用戶友好的操作設(shè)計(jì)以及廣泛的應(yīng)用兼容性,成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)設(shè)備。它從樣本質(zhì)量控制的源頭為下游實(shí)驗(yàn)的可靠性提供了保障,對(duì)于追求數(shù)據(jù)精準(zhǔn)、樣本高效利用的研究與檢測(cè)工作具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)室在引入該設(shè)備時(shí),建議結(jié)合實(shí)際樣本類型與通量需求進(jìn)行綜合評(píng)估。